简介:RNAfollowAll(组织 RNA、蛋白质和 DNA保存液)是一种液体的,安全无毒的组织保存 制剂,其可迅速渗入到组织内,稳定和保护细胞的 RNA、蛋白质和 DNA于原位。组织样 品在RNAfollowAll中保存,不会引起 RNA、蛋白质和 DNA的降解,可不用立即处理样 品或将样品冷冻在液氮。保存在该试剂中的样品,可在室温保存 1周,或-20℃/-80℃长 期保存,且反复冻融不会显著影响其中 RNA、蛋白质和 DNA的品质。
产品特色
Ø 样品无需液氮处理和冷冻保存
Ø 即时 RNase(核糖核酸酶)灭活可以保存 RNA
Ø *大限度减少研磨和冷冻
Ø 长期保存且可反复冻融
Ø 用途广,可保存、运输和邮寄等
Ø 同时保存组织样品的 RNA、蛋白质和 DNA
操作步骤
1.需先估量加入 RNAfollowAll中的组织重量,根据加入至少 10倍体积组织的量来确定加 入 RNAfollowAll的使用量,如:组织 100mg需加入 1mlRNAfollowAll。
2.动植物组织:切割获得组织样品,对于过大的组织需剪切成任何一边的*大厚度不超过 0.5cm,完全侵入到 RNAfollowAll保存液中。 培养的细胞、细菌和真菌等:离心收集细胞,弃去上清,将细胞等用 PBS清洗一次,再用 少量的 PBS重悬,然后加入 2倍体积的 RNAfollowAll溶液保存。 注:RNAfollowAll能用于新鲜组织,在浸入 RNAfollowAll之前不可冷冻组织。组织样 品体积尽量小,对于过大组织样品要简单切碎,*大厚度不可超过 0.5cm。
3.在 RNAfollowAll保存时间:在 37℃可保存 2天;在室温(25℃)可保存一周时间;4℃可 至少保存 1个月;对于-20℃或-80℃长期保存,先将样本在 4℃条件下过夜渗透,再移入 到-20℃或-80℃长期保存。 注:RNAfollowAll或破坏组织样品的结构,可反复冻融至少 20次以上,不会显著影响 RNA、蛋白质和 DNA完整性。若需长途运输,在运输过程中需确保组织完全浸入在 RNAfollowAll中。
4.a.保存在 RNAfollowAll中样品的 RNA提取:RNAfollowAll溶液可与多数的 RNA提取方法兼容,如常见的 TRIzol或柱式 RNA提取试剂盒。 b.保存在 RNAfollowAll中样品的蛋白质提取:RNAfollowAll溶液可与多数的蛋白的提取 方法兼容,如常见的 RIPA裂解提取。 c.保存在 RNAfollowAll中样品的 DNA提取:RNAfollowAll溶液可与多数的 DNA提取方 法兼容。
注:对于组织样品:用灭菌镊子将组织从 RNAfollowAll中取出,移入到相应的溶剂中, 根据实验需求经行后续操作;对于细胞样品:可通过离心步骤,去除样品中 RNAfollowAll 溶液,再根据实验需求进行后续操作。
l 保存条件 室温保存,运输,二年有效;低温贮存可能会产生沉淀或析出晶体,需 37℃完全溶 解后再用。
l 注意事项 1.RNAfollowAll溶液只能保存新鲜组织样品,不能用于冷冻样品的保存本品适用于 NC膜 和 PVDF膜,推荐使用 PVDF膜,效果更佳; 2.组织样本任何一边的*大厚度不能大于 0.5cm,然后将组织块放入到 10倍体积的 RNAfollowAll中保存,要完全浸入到 RNAfollowAll中。 3.离心沉淀细胞,去除 RNAfollowAll,需至少 5000g以上的离心力。 4.植物叶片不适合用该试剂保存,因表面的腊表皮使 RNAfollowAll很难完全渗入。 5.全血、血浆或血清中的 RNA不可保存在 RNAfollow中,因为它们蛋白含量过高,与 RNAfollow混合后易形成不溶的沉淀。对于全血中白细胞的保存,要将白细胞从红细胞 和血清中分离出来,并按组织培养细胞一样处理后,白细胞便能有效地保存在 RNAfollow All中。