操作步骤 

1. 吸取培养基，用无菌的 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以除去残余的血清。 

2. 加入适量的胰蛋白酶消化液，略盖过细胞即可。根据细胞的特性可以增加或减少胰酶用 量，室温放置 30 秒至 2 分钟。（不同的细胞消化时间有所不同） 

3. 显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的 变化呈白茫状；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。 

4. 此时吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于 后续实验。如果发现消化不足，则加入胰酶细胞消化液重新消化。 

保存条件

-20℃保存，冰袋运输，至少 1 年有效；

注意事项

1. 应根据不同组织和细胞的性质确定*佳消化时间和胰蛋白酶的用量，消化时间不宜过 长，以免影响细胞的活力。 

2. 解冻后宜分装使用，避免反复冻融。